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透射电镜原理及其样品制备(透射电镜的成像原理)

透射电镜的成像原理

透射电镜(transmission electron microscopy, 简称TEM)是一种利用电子束通过物体的透射成像的高分辨显微技术。透射电镜的成像原理是利用高维电子束穿过薄片状样品,根据电子束透过度的差异,通过像差校正、聚焦透射电镜镜头和几何电子光学等手段进行成像。

透射电镜成像流程

透射电镜成像的流程包含:电子源产生电子束,运用准直器将电子束准直,通过物镜透射样品,成像,再传输到投影差校正(Image Filter)进行校正和改善后,形成最终图像。

透射电镜的成像分为两种模式,常规模式为展现原子晶体学中的结构特征,高分辨模式则用于获取细胞分子的图像。

透射电镜的样品制备

透射电镜所需要的样品一般都是在10-100nm厚度的极薄样品,这是由于只有这种样品能够让电子透射,从而形成高分辨的透射电镜图像。

常用的透射电镜样品制备方法有:化学固定、横切凝胶浸渍、离心浓缩和冷冻裂解等方法。

其中,离心浓缩是用于获得含大量微生物数量的样品,因为标本的准备过程所用时间非常短,无需使用化学固定剂对标本进行固定。而冷冻裂解则是利用大型设备,将细胞快速冷冻并破裂成片,随后形成一层薄膜,这是透射电镜中常用的样品制备方法之一。

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